近日,我院李三暑研究小组通过整合DNA核酶于随机序列文库,筛选出含有表达平台的异构核酶,建立了Expression-SELEX筛选新方法。相关研究成果以“Selection of allosteric dnazymes that can sense phenylalanine by expression-SELEX”为主题,发表在Nucleic Acids Research期刊,最新影响因子19.16。
适配体通常由SELEX(指数富集的配体系统进化)技术产生,目前适配体已经被广泛应用于生物感应器、诊断工具和治疗药物等。但适配体作为生物感应器往往需要连接一个表达平台,用于报告配体结合与否。传统上,适配体的筛选和表达平台的整合是两个分开的步骤,另外适配体的筛选必须固定适配体文库或者配体。这些缺点可以通过整合核酶于筛选步骤中,筛选异构核酶得以克服。李三暑研究小组选择DNA核酶II-R1作为表达平台,整合到SELEX筛选步骤中,整个筛选过程不需固定适配体文库或者配体,而且目标适配体可以通过剪短了的核酶筛选得到。因此本研究建立了高效的Expression-SELEX, 用于富集高质量的、能感应配体的异构核酶。
bwin必赢李三暑教授为本论文的通讯作者,硕士研究生陈彬汾为本论文的第一作者负责主要实验,鑫梅、高挺、吴瑶瑶以及张晓俊老师参与了部分研究。该项工作得到了国家自然科学基金、福建省自然科学基金、泉州市科技局项目、厦门市自然科学基金、厦门市“双百”计划人才项目、华侨大学研究基金项目的资助。